准备线虫的食物—OP50的制备
2019-08-12 16:21
阅读次数：0
秀丽隐杆线虫通常在实验室中以大肠杆菌OP50菌株作为单一的食物来源(布伦纳，1974)。大肠杆菌OP50是尿嘧啶营养缺陷型，只能在NGM平板上生长。为了使让线虫更容易观察，同时更好地繁育，需要一定厚度的菌苔。大肠杆菌的起始培养物OP50可以从上源生科或是CGC获得，也可以从虫板中回收。
沾取op50菌液在无抗板上画单斑（封口膜封口，37度培养12小时或者过夜），取出OP50单斑的平板，用无菌枪尖挑取一个克隆到50ml LB培养基中，于37℃摇床12小时或过夜振荡培养（220rpm）。培养好的OP50菌液在4℃可以保存一个月。
2．菌液测试
1）将扩增好的OP50菌液摇匀，用移液器吸取约20μl至NGM平板中
2）菌液测试板上有数字标记，代表不同瓶菌液。菌液被吸收后的平板倒置，于37℃过夜培养。整个过程严格无菌操作。
3）37度培养两天后，或者是在室温培养三天后，观察菌斑状态是否合格。
4) 观察是否有杂菌，若测试板上长出大量杂菌（菌落突起，色泽亮丽），需重新摇菌。
上一篇：没有了
下一篇：把OP50菌接种在NGM板上